《電子技術(shù)應(yīng)用》
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微納生物傳感檢測(cè)儀器 讓咱老百姓吃得放心

2015-12-31

  近年來,我國(guó)的食品安全突發(fā)事件層出不窮。而這些食品安全問題大多源于食源性致病菌的污染和食品生產(chǎn)、加工過程中對(duì)農(nóng)藥、獸藥、添加劑等的不科學(xué)使用,甚至是違用、濫用等違法、違規(guī)行為所致。要從根本上解決食品安全問題,就必須對(duì)食品的生產(chǎn)、加工、流通和銷售等各環(huán)節(jié)實(shí)施全程管理和監(jiān)控,食品安全快檢技術(shù)也就隨之應(yīng)運(yùn)而生。

  “實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和儀器很難及時(shí)、快速而全面的從各環(huán)節(jié)監(jiān)控食品安全狀況,而快速、方便、準(zhǔn)確、靈敏是食品安全快檢技術(shù)的最大優(yōu)勢(shì)?!敝袊?guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院首席科學(xué)家鄒明強(qiáng)說。

  以前,檢測(cè)瘦肉精、三聚氰胺需要價(jià)值數(shù)百萬元甚至上千萬元的儀器設(shè)備,如今,一張價(jià)值幾元的檢測(cè)卡插在豬尿和牛奶中,幾分鐘就會(huì)顯示結(jié)果。一個(gè)粉筆盒大小的試劑盒,可以精確地檢測(cè)出食品中是否含有對(duì)人體有害的農(nóng)獸藥殘留物及其含量??這就是食品安全快檢的“魔力”。

  “以試劑盒、ELISA、PCR納米生物技術(shù)、生物傳感技術(shù)便攜式分析儀器等為代表的快速檢測(cè)、移動(dòng)檢測(cè)技術(shù)在中國(guó)食品安全保障體系中扮演著重要的角色?!编u明強(qiáng)認(rèn)為,其中生物傳感器技術(shù)具有快速、靈敏、特異、簡(jiǎn)便等特點(diǎn),在食品檢測(cè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

  近幾年,在鄒明強(qiáng)的帶領(lǐng)下,中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院研究團(tuán)隊(duì)針對(duì)禽流感、甲型H1N1流感和瘦肉精等重大公共衛(wèi)生安全事件迫切的檢測(cè)技術(shù)需求,基于微納生物傳感技術(shù),以發(fā)展“既快又靈”的高效檢測(cè)技術(shù)為目標(biāo),通過原理創(chuàng)新和技術(shù)發(fā)明,構(gòu)建了服務(wù)于食品和公共衛(wèi)生安全保障的檢測(cè)方法系統(tǒng)。該項(xiàng)目榮獲2014年度北京市科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)。

  小小快檢用處大

  據(jù)了解,食品質(zhì)量安全檢測(cè)方法有很多,包括現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)方法,實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè)方法,以及確認(rèn)方法等。從實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)來看,快速檢測(cè)方法其實(shí)是起到了有益的補(bǔ)充,這是由它自身的特點(diǎn)決定的。與傳統(tǒng)儀器方法相比,快檢技術(shù)快速、簡(jiǎn)單,可以測(cè)固體及液體樣品。而且快速檢測(cè)對(duì)配套的前處理設(shè)備要求不高,可以允許提取樣品中雜質(zhì)成分的存在,同時(shí)也就決定了其市場(chǎng)地位在篩選中的必須性,這樣可以與高檔的儀器進(jìn)行互補(bǔ),以快速檢測(cè)方法進(jìn)行初篩,再用儀器方法進(jìn)行確證,從而構(gòu)建效率和準(zhǔn)確度均較高的檢測(cè)體系。

  快速檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于前端,直接性、時(shí)效性、現(xiàn)場(chǎng)感??焖贆z測(cè)的形式是與生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)、時(shí)間要求相結(jié)合,而傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)通常用時(shí)較長(zhǎng),例如將產(chǎn)品送到第三方檢測(cè)中心進(jìn)行檢測(cè),快則幾日,慢則一兩周,對(duì)于生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者來講,時(shí)間成本的損耗是巨大的。這就需要企業(yè)自身在生產(chǎn)初期、源頭位置對(duì)風(fēng)險(xiǎn)加以把控。產(chǎn)品質(zhì)量安全需要依靠質(zhì)量管理與前端風(fēng)險(xiǎn)排查、檢測(cè),這樣才有可能在產(chǎn)品出廠前,最大程度保證其質(zhì)量安全。

  構(gòu)建“既快又靈”的檢測(cè)技術(shù)系統(tǒng)

  據(jù)了解,現(xiàn)有快檢技術(shù),主要為膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法,雖然操作簡(jiǎn)便、成本低,但其靈敏度不夠高。“如果強(qiáng)調(diào)靈敏準(zhǔn)確,則難于實(shí)現(xiàn)便捷,存在‘靈而不快’問題,導(dǎo)致安全因子發(fā)現(xiàn)不及時(shí);若兼顧快速、高通量,則不宜實(shí)現(xiàn)靈敏可靠,存在‘快而不靈’問題,導(dǎo)致誤檢和漏檢,留下安全隱患?!编u明強(qiáng)說,“既靈敏又快速”的檢測(cè)技術(shù)成為亟待攻克的技術(shù)難題。

  生物傳感器檢測(cè)技術(shù)系以識(shí)別元件(酶、抗體/抗原、核酸、標(biāo)記材料等)為特異性載體而轉(zhuǎn)換為電、光、磁等信號(hào)實(shí)現(xiàn)檢測(cè),為解決上述問題提供了新興的技術(shù)途徑。

  “針對(duì)我國(guó)食品和公共衛(wèi)生安全檢測(cè)的更高要求,亟待開展融合前沿微納米技術(shù)的現(xiàn)代生物傳感檢測(cè)技術(shù)攻關(guān),大幅度提升檢測(cè)靈敏度、定量化、通量、多靶分型和同檢等分析性能,實(shí)現(xiàn)既快又靈檢測(cè),提供高效、實(shí)用、便捷、可靠的快檢解決方案,破解‘檢不出’‘檢不準(zhǔn)’‘檢不快’難題,為食品和公共衛(wèi)生安全提供服務(wù)和技術(shù)支撐?!编u明強(qiáng)表示。

  在鄒明強(qiáng)的帶領(lǐng)下,研發(fā)團(tuán)隊(duì)通過研究納米金顆粒原位聚集效應(yīng),建立層析快檢卡通用增敏技術(shù),開發(fā)熒光膠乳定量試紙條及熒光檢測(cè)儀,解決“快而不靈”的問題,實(shí)現(xiàn)高危病原“既快又準(zhǔn)”檢測(cè)。

  項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)提出了流式技術(shù)競(jìng)爭(zhēng)式免疫分析新原理,發(fā)明了編碼微球及熒光探針試劑制備技術(shù),開發(fā)多種小分子同步檢測(cè)方法,解決“靈而不快”的問題,實(shí)現(xiàn)多種農(nóng)獸藥高通量篩檢,引入不確定度概念,保證檢測(cè)結(jié)果客觀、準(zhǔn)確;闡明酶分子構(gòu)象穩(wěn)定機(jī)制,突破抗原決定簇類結(jié)構(gòu)修飾難題,建立酶活性保護(hù)技術(shù)與類特異抗體制備技術(shù),開發(fā)類檢試劑盒(卡),解決農(nóng)獸藥類檢穩(wěn)定性及包容性難題,并開發(fā)共軛濾光定量檢測(cè)器,實(shí)現(xiàn)層析快檢卡數(shù)字判讀;集成熒光探針、生物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等,建立分子馬達(dá)核酸分型傳感檢測(cè)技術(shù),實(shí)現(xiàn)食源性病原菌多型同檢。

  “由此我們構(gòu)建了‘既快又靈’的檢測(cè)技術(shù)系統(tǒng),成果應(yīng)用實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化及產(chǎn)業(yè)化,為提升公共衛(wèi)生安全應(yīng)對(duì)能力提供檢測(cè)技術(shù)支持?!编u明強(qiáng)說。

  傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)實(shí)現(xiàn)飛躍

  “該項(xiàng)目綜合利用多項(xiàng)微納生物傳感技術(shù),建立了系列高靈敏高通量檢測(cè)技術(shù),在實(shí)現(xiàn)技術(shù)創(chuàng)新的同時(shí)也推動(dòng)了相關(guān)技術(shù)的進(jìn)步?!编u明強(qiáng)說。

  首先,項(xiàng)目技術(shù)改善提升了傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)水平,實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)的飛躍。膠體金免疫層析檢測(cè)技術(shù)具有簡(jiǎn)便快速、成本低等優(yōu)勢(shì),現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)應(yīng)用廣泛,但靈敏度低與不能定量檢測(cè)大大限制了它的應(yīng)用范圍。該項(xiàng)目建立了納米金增敏技術(shù),大幅度提高傳統(tǒng)膠體金檢測(cè)方法的靈敏度,在與禽流感國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法的比對(duì)測(cè)試中,準(zhǔn)確度一致,靈敏度相當(dāng),增敏技術(shù)使膠體金檢測(cè)技術(shù)達(dá)到了定量PCR的水平,有效提高了疫病防控水平。

  同時(shí),項(xiàng)目研發(fā)團(tuán)隊(duì)用熒光標(biāo)記取代了傳統(tǒng)的金標(biāo)記,實(shí)現(xiàn)了層析檢測(cè)的定量檢測(cè),更加擴(kuò)展了層析檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用范圍,特別是通過目標(biāo)物含量的多少來進(jìn)行的檢測(cè)?!斑@項(xiàng)技術(shù)使傳統(tǒng)免疫層析技術(shù)實(shí)現(xiàn)了靈敏度大幅提升與定量測(cè)定?!编u明強(qiáng)說。

  其次,該項(xiàng)目是多技術(shù)交叉融合,通過合力提升了技術(shù)水平。在流式熒光編碼微球檢測(cè)技術(shù)中,應(yīng)用化學(xué)與材料技術(shù)合成了量子點(diǎn)等標(biāo)記物,應(yīng)用生物技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)物的準(zhǔn)確捕獲,在檢測(cè)結(jié)果的判定中又引入了不確定度等統(tǒng)計(jì)學(xué)概念,使檢測(cè)結(jié)果更加客觀科學(xué),幾種技術(shù)集合在一起形成的是具有多種優(yōu)點(diǎn)的檢測(cè)技術(shù)。

  最后,根據(jù)應(yīng)用需求,建立了點(diǎn)面結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)。準(zhǔn)確測(cè)定目標(biāo)物是檢測(cè)技術(shù)的終極目標(biāo),而測(cè)定類別也具有廣泛的實(shí)際需求。然而,目前廣泛使用的農(nóng)殘酶抑制法快篩法,因酶試劑難于在通常條件下保存和運(yùn)輸,制約了該法的應(yīng)用可靠性。

  “該項(xiàng)目發(fā)明了穩(wěn)定貯藏酶試劑配方,有效保障了該方法的可靠性,提高了其應(yīng)用價(jià)值,該方法一次可檢測(cè)涵蓋約300種高毒農(nóng)藥。”鄒明強(qiáng)說。

  據(jù)了解,該項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)圍繞快檢儀器、試劑(卡、盒)及方法構(gòu)建了較為完整的快檢技術(shù)系統(tǒng),獲國(guó)際專利授權(quán)1項(xiàng),國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)15項(xiàng),軟件著作權(quán)1項(xiàng),制定國(guó)標(biāo)3項(xiàng),醫(yī)療器械注冊(cè)證6項(xiàng),發(fā)表SCI論文35篇。項(xiàng)目禽流感層析傳感增敏技術(shù)經(jīng)第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)驗(yàn)證,與國(guó)標(biāo)定量PCR法檢測(cè)結(jié)果一致且靈敏度相當(dāng);參加全國(guó)甲型H1N1流感雙盲雙測(cè)篩選名列第一;鑒定意見認(rèn)為項(xiàng)目整體技術(shù)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。

  “項(xiàng)目以需求為牽引,以應(yīng)用為導(dǎo)向,利用微納生物傳感技術(shù)實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)技術(shù)的突破,既推動(dòng)了檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,也反饋促進(jìn)了微納生物傳感技術(shù)的發(fā)展?!编u明強(qiáng)說。

  項(xiàng)目成果開花結(jié)果

  如今,項(xiàng)目成果已廣泛用于甲型H1N1流感全國(guó)聯(lián)防聯(lián)控、國(guó)境檢驗(yàn)檢疫、國(guó)家殘留監(jiān)控計(jì)劃、北京奧運(yùn)和上海世博會(huì)食品安全保障,大力促進(jìn)了我國(guó)應(yīng)對(duì)公共衛(wèi)生安全水平提升。

  據(jù)了解,自2005年以來,項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)基于項(xiàng)目微納生物傳感原理開發(fā)了系列快速檢測(cè)技術(shù)及產(chǎn)品,并積極進(jìn)行產(chǎn)品規(guī)模化生產(chǎn),開拓產(chǎn)品市場(chǎng),為科技成果轉(zhuǎn)化樹立了良好典范,陸續(xù)在我國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫、農(nóng)業(yè)、工商、質(zhì)監(jiān)和衛(wèi)生等200多個(gè)食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)和1000多家企業(yè)得到廣泛應(yīng)用,出口至20多個(gè)國(guó)家或地區(qū)。

  北京勤邦生物公司基于該項(xiàng)目核心技術(shù)開發(fā)的磺胺類十五合一試劑盒、磺胺類試紙條、喹諾酮類試劑盒、喹諾酮類試紙條、四環(huán)素類試劑盒、四環(huán)素類試紙條、β-內(nèi)酰胺類+四環(huán)素類二聯(lián)卡、呋喃西林代謝物試劑盒產(chǎn)品顯著提高了檢測(cè)性能,實(shí)現(xiàn)了多靶同檢,大幅提升了企業(yè)自檢自控能力,取得了良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

  據(jù)介紹,勤邦公司的部分產(chǎn)品性能指標(biāo)優(yōu)于國(guó)外產(chǎn)品,檢測(cè)成本僅為同類產(chǎn)品的2/3,有效替代進(jìn)口產(chǎn)品。檢測(cè)集約化和多元化,檢測(cè)效率高,檢測(cè)成本低,節(jié)約了資金。相關(guān)快檢產(chǎn)品被評(píng)為“中關(guān)村國(guó)家示范區(qū)新技術(shù)新產(chǎn)品”,并出口至印度、泰國(guó)、新加坡等10多個(gè)國(guó)家,近三年經(jīng)濟(jì)效益顯著。

  “如今,利用該項(xiàng)目成果的快檢產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于全國(guó)各地蔬菜、水果農(nóng)殘檢測(cè)。”鄒明強(qiáng)介紹說,寧夏天然蜂產(chǎn)品公司應(yīng)用項(xiàng)目成果進(jìn)行產(chǎn)品自檢自控,有效保障了其產(chǎn)品質(zhì)量安全,“十里花”蜂產(chǎn)品暢銷國(guó)際市場(chǎng)。“應(yīng)用項(xiàng)目快檢技術(shù)縮短檢驗(yàn)周期,提高檢測(cè)效率,保障了50多億元銷售額產(chǎn)品安全”。


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